Государственная фармакопея Республики Беларусь -
Скачать (прямая ссылка):
компенсационного растворов, должны иметь одинаковое пропускание (или
оптическую плотность) при заполнении одним и тем же растворителем. В противном случае это различие следует учитывать.
ПРОИЗВОДНАЯ СПЕКТРОФОТОМЕТРИЯ
В производной спектрофотометрии используется преобразование исходного спектра поглощения (нулевой порядок) в производные спектры первого, второго и более высоких порядков.
Производный спектр первого порядка представляет собой график
зависимости градиента кривой поглощения (скорость изменения оптической плотности с длиной волны^ДШ) от длины волны.
Производный спектр второго порядка представляет 2собо2й график
зависимости кривизны спектра поглощения от длины волны (d2^/^2). Вторая производная при любой длине волны Л связана с концентрацией следующим соотношением
d2A d2A™ cb d2e
----=----------=-----с b,
dl2 dl2 10 dl2
где:
с' - концентрация поглощающего раствора, в граммах на литр.
Прибор. Используют спектрофотометр, отвечающий указанным выше требованиям и оснащенный аналоговым резистентноемкостным дифференцирующим модулем или цифровым дефференциатором, или другими средствами получения производных спектров. Некоторые методы получения производных спектров второго порядка сдвигают их относительно спектра нулевого пордяка, что следует учитывать там, где это необходимо.
Разрешающая способность. Если указано в частных статьях, записывают производный спектр второго порядка для раствора 0,2 г/л толуола Р в метаноле Р, используя метанол Р в качестве компенсационного (сравнения) раствора. На спектре должен присутствовать небольшой отрицательный экстремум, расположенный между двумя большими отрицательными экстремумами при 261 нм и 268 нм, соответственно, как показано на Рис. 2.2.25.-1. Если нет других указаний в частных статьях, отношение А/В (см. Рис.2.2.25.-1) должно быть не менее 0,2.
Рис. 2.2.25.-1.
Методика. Готовят раствор испытуемого вещества, устанавливают различные инструментальные характеристики в соответствии с инструкцией к прибору и рассчитывают количество определяемого вещества, как указано в частной статье.
# ИДЕНТИФИКАЦИЯ
Абсорбционную спектрофотометрию в ультрафиолетовой и видимой областях спектра обычно применяют для идентификации лекарственного средства в следующих вариантах:
1. Сравнение спектров поглощения испытуемого раствора и раствора сравнения; в указанной области спектра должно наблюдаться совпадение положений максимумов, минимумов, плечей и точек перегиба.
2. В указанной области спектра при указанных длинах волн должны наблюдаться максимумы, минимумы, плечи и точки перегиба; возможно указание только некоторых из этих характеристик. Расхождение между наблюдаемыми и указанными длинами волн не должно обычно превышать 2 нм.
3. В дополнение к варианту 2 приводят еще и удельные показатели поглощения при указанных длинах волн.
4. В дополнение к варианту 2 приводят отношения оптических плотностей при указанных длинах волн.
Возможны и другие варианты применения, оговоренные в частных статьях.
# КОЛИЧЕСТЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ
Рекомендуется такая схема проведения спектрофотометрических измерений: “В измерительную кювету помещают испытуемый раствор и определяют его оптическую плотность по сравнению с компенсационным раствором. Затем кювету вынимают, удаляют ее содержимое, снова помещают испытуемый раствор и снова определяют оптическую плотность. Операцию повторяют, получая не менее трех значений оптической плотности для испытуемого раствора. Таким же образом получают не менее трех значений оптической плотности для раствора сравнения. Следует избегать попадания исследуемого раствора на внешнюю стенку кюветы. Для расчетов используют среднее значение полученных оптических плотностей испытуемого раствора и раствора сравнения”.
1. Однокомпонентный одноволновой анализ. Однокомпонентный одноволновой анализ (или "обычная спектрофотометрия”) - это количественное определение одного из компонентов лекарственного средства посредством измерения оптической плотности раствора испытуемого образца при одной аналитической длине волны (АДВ).
Такой анализ может проводиться методом показателя поглощения (МПП) и методом стандарта (МС).
При использовании МПП количественное определение проводят посредством измерения оптической плотности (А) раствора испытуемого образца при аДв и расчете концентрации (с) анализируемого компонента по формуле:
с = —, (1)
А1% ' '
1с
1 см
